No.015　グラム染色

７月中旬 　微生物の授業にもなれてきたかな？、２年生。 本日は、微生物利用の時間で、グラム染色を行いました。

今回行う実験は、色素の抜け方の差から細胞壁の厚みで菌を分類する実験です。 以前行った「手指の細菌調査」で培養できた菌を分類します。

まずは、白金耳を火炎滅菌します。 十分冷ましてから、次の操作にうつりましょう。

まず、スライドガラスに滅菌水を１滴垂らします。 分離したコロニーから、菌を１白金耳釣菌し、滅菌水に懸濁します。

懸濁水を、遠火で乾燥させます。 乾いた後、直火に軽く通し菌を固定します。

十分にガラスが冷めたら、クリスタルバイオレットを数滴垂らします。

次に、ヨード液を垂らし、１分間待ちます。 クリスタルバイオレットのロザリン色素＋ヨードで非常に固着しやすい色素になります。

色素液をペーパーで拭き取り、アルコールで３０秒洗います。 細胞壁のうすい菌は細胞壁が破損し、アルコールで色素が流れ出てしまいます。

赤色のサフラニン色素を垂らし、数分待ちます。 この後、スライドガラス裏から流水で色素を流します。

染色が終わったら、顕微鏡で観察を行います。 菌体が紫色に染まっていたら、グラム陽性菌（細胞壁が厚い）、 菌体が赤色に染まっていたら、グラム陰性菌（細胞壁が薄い）となります。

複雑な操作でしたが、菌の構造について知れたのではないでしょうか。 菌についてもっと深くまで知れるといいですね。